摘 要

本实验从江西南昌枫香根际枫土壤中分离纯化出20株细菌。首先综合晕圈法及测定经NBRIP-BPB培养后的上清液吸光度，初步筛选出5株具有解无机磷能力的菌株。其中JX1A和JX1B解磷圈与菌落直径比值较大在3.0以上，600nm处OD值也都小于-1， JX1B的D/d值为最大，达到5.32，其OD600nm为-1.202。再将这5株菌接种到NBRIP培养液中进行液体培养复筛，最终筛选出2株高效解无机磷菌株，JX1A解磷率最高达19.75%，其菌体发酵液可溶性磷含量达到了1072.399mg·L^-1，是CK(对照)的12.6倍。最后对JX1A进行了解磷动力学的研究，在第6天解磷量达到最高值。

关键词：枫香 根际土壤 解无机磷细菌 筛选

Abstract

The laboratory isolated and purified about 20 inorganic phosphorus-solubilizing bacteria from the soil of Liquidambar formosana Hance rhizosphere that can represent the regions of Jiangxi province .We get screened 5 inorganic phosphorus -solubilizing bacteria by Initial screening，Which is screened by transparency circle and the OD value at 600 nanaometer。The diameter ratios of transparency circle and Colony diameter in bacteria JX1A and JX1B is more than 3.0. Especially the bacterium JX1B whose diameter ratio is up to 5.32, what’s more,the OD value at 600 nanaometer is less than minus 1. In further filter,we screened 5 kinds of bacteria through NBRIP inorganophosphorus medium by liquid culture ,2 efficient organicphosphorus-solubilizing bacteria were found after three days culture. The solubilizing rate of JX1A is 19.75% and the fermenting soluble phosphorus of bacterium JX1A reached 1072.399mg·L - 1 , 12.6 times than CK（antiese）. Finally,the phosphorus dynamics research of JX1A indicated that the solubilizing quantity reached the top at the sixth day.

Keywords : Liquidambar formosana ; Rhizosphere soil ; Inorganic phosphorus-solubilizing bacteria ; screen

目录

第一章 文献综述 1

1 枫香概述 1

2土壤中磷资源概况 2

2.1土壤磷简介 2

2.2 土壤无机磷组成 2

3 土壤解磷菌研究进展 3

3.1 解磷细菌的种类、数量及生态分布 3

3.2无机解磷菌的解磷机理 4

4土壤中无机磷的转化 7

4.1 磷的固定 7

4.2 磷的释放 8

5.本课题研究目的和意义 8

第二章 枫香根际无机解磷细菌的筛选 9

1 材料与方法 9

1.1材料 9

1.2方法 10

2结果与分析 11

2.1枫香根际细菌的分离、纯化 11

2.2枫香根际解无机磷细菌解磷能力 11

3结论与讨论 18

第三章 全文总结和展望 19

1全文总结 19

2 展望 20

致 谢 21

参考文献 21

第一章 文献综述

1 枫香概述

中国枫香(Liquidambar formosana)为金缕梅科枫香亚科枫香属的高大落叶乔木, 别名为枫木、黑饭木、香枫等, 是我国重要的乡土树种, 也是亚热带地区优良速生落叶阔叶树种, 其适应性广、生长迅速, 属典型的荒山先锋树种。维护地力效果明显, 生态效益好, 是人工林树种结构调整的首选树种之一。

中国枫香生长快，耗水耗费量大，种植中国枫香的林地往往容易导致土壤养分缺乏。就影响中国枫香生长的养分因素来看，土壤中有效磷含量高低是制约中国枫香生长的重要因素之一。随着对木材需求量的巨增，森林资源的逐步匮乏，速生中国枫香的种植量明显上升。最初仅作为观赏树种和科研林木，后来逐渐被引种为绿化树种，现在作为缓解木材和林产品需求紧张的主要树种，中国枫香被广泛种植。在观赏、药用、用材等方面都具有重要作用。近年来, 中国枫香在生产、科研上备受重视, 是很有潜力的造林绿化树种。中国枫香具有重要的经济和生态价值。

我国南方多为红壤区，该区域是我国重要的中国枫香生产基地。但是由于南方高温多雨，加之人工不合理的耕作，土壤分化严重，使得土壤酸化现象严重，土质呈酸性^[1]。而红壤中富含活性铁和铝，可溶性磷易与铁、铝相结合形成难溶性的磷酸铁与磷酸铝，导致土壤有效磷含量降低^[2],有报道表明南方红壤中全磷含量在0.05%以下，有效磷含量在1-2mg/kg之间^[3]。因此磷成为中国枫香营养的限制因素。利用土壤中自有的微生物的解磷功能，可以在保持土壤原有结构形状的前提下，提高土壤可被植物吸收利用的可溶性磷含量。无机解磷微生物具有将土壤中难溶性的磷溶解为植物可吸收利用的有效磷的生物学特性，不仅能提高土壤中有效磷含量，促进植物对磷的吸收利用，而且能促进植物的生长。

2土壤中磷资源概况

2.1土壤磷简介

磷是细胞内磷酸腺苷、糖脂、磷脂核酸以及含磷辅酶的重要组成成分。磷在植物能量代谢、碳水化合物代谢、氮代谢、物质转运及信号转导过程中起着不可替代的作用，而植物体需要的磷主要是从土壤磷库中获得的^[4-7]。

磷是限制植物生长的主要营养元素之一,其在土壤中主要以难溶的矿物态存在^[8]，可溶性磷肥施入土壤后大部分很快发生专性吸附和化学沉淀固定,转变成植物难以吸收利用的无效态磷,导致作物对磷肥的当季利用率很低,即使加上后效,其利用率一般也不超过25%^[9]。因此,大部分磷肥以难溶的无效态在土壤中积累起来，释放这些被固定在土壤中的磷对于提高土壤磷素有效性、减少磷肥使用量具有重要意义.