摘 要

采集垂珠花六个自然居群中一年生枝、果实、种子、成熟叶片等部位为材料，通过测定14个性状，分析其居群的表型多样性，并用SSR分子标记开展垂珠花在DNA水平上的遗传多样性分析，以揭示垂珠花野生资源的遗传多样性状况及其与形态变异之间的关系。

结果表明：以垂珠花6个自然居群的87份样品为材料，4对SSR引物共检测到43个等位基因，平均每条引物10.63个，居群的平均多态引物比率平均为100%。平均观察杂合度（Ho）和期望杂合度（He）分别为0.659和0.811；居群间遗传分化系数Fst=0.118，表明其居群的遗传分化程度较低，88.2%的遗传变异来自于居群内，11.8%的遗传变异来自于居群间，与形态变异研究所得结论大体相一致；且居群内存在显著近交现象（Fis=0.192），基因流（Nm）较高，达2.050。因此，垂珠花自然居群的遗传多样性水平较丰富。

关键词：垂珠花；SSR标记；表型变异；遗传多样性

Phenotypic differences and SSR marker analysis of Styrax dasyanthus Perk.

Abstract

The objective of this work was by measuring 14 phenotypic characters which were annual branches, fruits, seeds, leaves, and microsatellite markers at the DNA level were implemented to reveal the relationship of phenotypic diversity and genetic diversity of six natural populations of Styrax dasyanthus.

The results indicated that：Eighty-seven samples of six natural populations were taken, and a total of 43 alleles were detected, with a mean of 10.63 per primer by four pairs of microsatellite primers. The mean percentage of the polymorphic loci of all the populations (P) was 100%. The mean of observed heterozygosity and expected heterozygosity were 0.659 and 0.811, respectively. According to coefficient of gene differentiation (Fst=0.118), the gene flow was higher (Nm=2.050), and the percentage variation among the populations was 11.8%, while the percentage variation within the populations was 88.2%, consistent with the conclusion of phenotypic variation research roughly, illustrating that the genetic differentiation of S. dasyanthus was quite low, and inbreeding within population (Fis=0.192). Consequently, the suggesting that was a high genetic diversity of natural S. dasyanthus populations.

Keywords: Styrax dasyanthus;SSR; Phenotypic variation; Genetic diversity

目 录

前 言 1

1 文献综述 2

1.1遗传多样性概念及意义 2

1.2遗传多样性的研究方法 2

1.3 SSR分子标记的应用 4

2 研究主要内容 4

3 材料与方法 4

3.1研究区域概括 4

3.2材料 5

3.2.1样本采集及处理 5

3.2.2仪器 6

3.2.3试剂 6

3.3实验方法 6

3.3.1形态性状调查与测定 6

3.3.2基因组DNA的提取 6

3.3.3 SSR引物筛选 7

3.3.4聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 8

3.4数据整理与分析 8

4 结果与分析 8

4.1居群形态性状变异及分化 8

4.2基因组DNA检测结果 9

4.3 SSR引物多态性分析 10

4.4居群的遗传多样性分析 11

4.5居群遗传分化与基因流分析 12

5 讨论与结论 13

5.1结论 13

5.2 讨论 13

5.2.1 形态多样性 13

5.2.2 居群的遗传变异性 14

5.2.3 居群遗传分化与基因流 14

5.2.4 居群形态变异与内在遗传多样性的关系 15

6 主要存在的问题 16

致 谢 17

参 考 文 献 18

附图 20

前 言

垂珠花（Styrax dasyanthus）为野茉莉科（Styracaceae）野茉莉属（Styrax）落叶小乔木，主要分布在于我国江苏、河南、山东、安徽、浙江、湖北、湖南、江西、四川等地区，多见于海拔100-1700米的丘陵、山地、山坡及溪边杂木林中^[1]。其花白色成串，清香优雅，形似茉莉花，盛开时繁花似雪，朵朵下垂，果实成熟时色艳形美，观赏价值较高，是很有利用价值的观花、观果类、药用及油料资源型芳香植物，具有较大的综合开发利用价值及广阔的运用前景。

目前，对垂珠花自然居群的遗传多样性、野生资源的保护和利用等方面的研究还很少，而以分子标记开展垂珠花的相关研究尚未见报道。笔者在南京地区几处自然居群进行野外调查时发现，垂珠花个体间叶片、果实、喙、种子及毛被等方面存在显著的形态变异状况，由此，笔者设想该状况的产生是否与其内在的遗传多样性有关。

随着DNA分子标记技术的发展，因SSR标记是选择中性的标记，并呈共显性的孟德尔式遗传，与比其他分子标记如RFLP、RAPD等相比，可检测更多的等位基因，提供更细致的基因变化分析范围，故在居群遗传学中该标记表现出了巨大的运用潜力而被广泛使用^[2]。本实验通过测定安徽、江苏、江西等地的垂珠花自然居群一年生枝、叶片、果实和种子等的14个性状，分析其居群间和居群内表型多样性；并采用SSR分子标记开展垂珠花在DNA水平上的遗传多样性分析，以揭示垂珠花野生资源的遗传多样性状况及其与形态变异之间的关系，为野生垂珠花居群的保护和利用提供理论依据。

1文献综述