茉莉酸甲酯和水杨酸甲酯对杨树多酚氧化酶的影响毕业论文

 2021-04-20 11:04

摘 要

多酚氧化酶是杨树体内重要的酶。本论文研究了茉莉酸甲酯和水杨酸甲酯2种化学诱抗剂对杨树扦插苗多酚氧化酶(PPO)酶活的影响。结果表明:0.01mmol/L茉莉酸甲酯处理杨树24 h和48h,对其PPO具有明显的诱导作用;10.0mmol/L茉莉酸甲酯处理杨树24 h,显著抑制PPO活性。0.1mmol/L水杨酸甲酯处理杨树24 h,诱导其PPO活性增加;1.0 mmol/L水杨酸甲酯处理杨树24 h和48 h,诱导其PPO活性增加;10mmol/L水杨酸甲酯处理杨树24 h,对其PPO具有显著的抑制作用。

关键词:杨树;茉莉酸甲酯;水杨酸甲酯;PPO活性;诱导;抑制

The effect on polyphenol oxidase by methyl jasmonate and methyl salicylate in poplar

Abstract: Polyphenol oxidase (PPO)is an important enzyme in poplar. The effect on PPO activity by methyl jasmonate and methyl salicylate was studied in poplar cutting seedlings. The results showed that PPO activity was induced after treated by 0.01mmol/L methyl jasmonate for 24h and 48h; while PPO activity was inhibited after treated by 10.0 mmol/L methyl jasmonate for 24h. Furthermore, PPO activity was induced after treated by 0.1mmol/L methyl salicylate for 24h; and PPO activity was induced after treated by 1.0 mmol/L methyl salicylate for 24h and 48h; while PPO activity was inhibited after treated by 10.0 mmol/L methyl salicylate for 24h.

Key words: poplar; methyl jasmonate; methyl salicylate; PPO activity; induction ; inhibition

目 录

1 前言.............................................................................................................................................1

1.1 多酚氧化酶(PPO)….....................................................................................................1

1.2 多酚氧化酶在植物细胞和组织中的定位........................................................................1

1.3 影响多酚氧化酶的因素....................................................................................................2

1.4 多酚氧化酶活性的测定....................................................................................................3

1.5 植物多酚氧化酶的应用前景和展望................................................................................3

1.6 茉莉酸甲酯和水杨酸甲酯及其应用................................................................................3

2 实验材料与方法.........................................................................................................................5

2.1 供试苗木............................................................................................................................5

2.2 供试化学试剂....................................................................................................................5

2.3 杨树的处理........................................................................................................................5

2.4 酶液的提取........................................................................................................................5

2.5 酶活的测定........................................................................................................................5

2.6 蛋白含量的测定................................................................................................................5

2.7 统计分析............................................................................................................................6

3 结果与分析.................................................................................................................................7

3.1 茉莉酸甲酯对杨树PPO活性的影响...............................................................................7

3.2 水杨酸甲酯对杨树PPO活性的影响...............................................................................8

4 讨论.............................................................................................................................................9

致谢................................................................................................................................................10

参考文献........................................................................................................................................11

1前言

1.1 多酚氧化酶(PPO)

多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)属核编码含铜金属酶,广泛存在于植物、真菌、昆虫等机体中。它可分为酪氨酸酶、儿茶酚氧化酶、漆酶等三大类。由于其能有效催化多酚类化合物氧化形成相应的醌类物质,因此被认为是导致酶促褐变反应的主要因素。早在 1937 年Kubowitz就在 Warburg实验室中第一次分离得到了多酚氧化酶[1]。植物多酚氧化酶是许多果蔬等农产品酶促褐变的主要原因, 同时它在植物的光合作用、抗病虫害、生长发育以及花色的形成中起一定作用[2]。PPO能催化单元酚和二元酚等多元酚到联苯酚的羟基化以及羟基酚到醌的脱氢反应。PPO定位于植物叶绿体的类囊体和其它类型质体的基质中,而植物体内PPO的底物存在于液泡中,且通常处于潜伏状态,因此,PPO与底物被区域化分开。但当植物体内发生生理紊乱或组织受损时,PPO与底物的亚细胞区域化才被打破,PPO的底物被激活。多酚氧化酶(PPO)能催化单元酚和二元酚等多元酚到联苯酚的羟基化,以及羟基酚到醌的脱氢反应,醌在植物体内自身聚合,或与细胞内蛋白质反应,产生黑色或褐色的沉淀物,被认为是植物体酶促褐变的主要原因[14],同时也是食品加工行业中影响产品的外观、风味、营养和加工性能的重要因素。PPO是农产品产生酶促褐变的主要酶类之一,近十几年来,随着生物化学和分子生物学的迅猛发展,PPO越来越受到国内外研究者的青睐。目前,十几种植物如番茄、马铃薯、甘薯、菠菜、蚕豆、美州商陆、葡萄、菠萝、苹果、梨、桃、日本批把、中国木瓜、荔枝、香蕉、茶树等的PPO基因已被克隆。此外,利用反义RNA技术也成功获得了抗褐变的马铃薯品种新品系,为控制果蔬等农产品的酶促褐变提供了一条新途径[3]

1.2 多酚氧化酶在植物细胞和组织中的定位

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