摘 要

以欧洲鹅耳枥实生苗带腋芽茎段为起始外植体，研究了欧洲鹅耳枥在组织培养条件下，不定芽的诱导、增殖、生根及试管苗的移栽，结果表明：

1、带腋芽茎段用75%酒精消毒30s，用无菌蒸馏水冲洗4次，再用0.1%升汞消毒15min，蒸馏水洗5次，污染率低于5%。

2、欧洲鹅耳枥外植体取材最佳时间为5月。

3、欧洲鹅耳枥不定芽诱导的最佳培养基为0.1mg·L^-1IBA 0.5mg·L^-1TDZ 3.0%蔗糖 0.7%琼脂的培养基,诱导率为37.5%。

4、IBA对欧洲鹅耳枥芽增殖具有促进作用，WPM 0.5mg/L6-BA 0.5mg/L IBA最利于欧洲鹅耳枥不定芽的增殖。

关键词：欧洲鹅耳枥；组织培养；植物激素；生根

The study on Rapid Propagation in vitro of Carpinus betula

Abstract

The study uses the seedling of Carpinus betulus with axillary bud stem section, researching on adventitious buds, proliferation, rooting, and plantlets transplant under the condition of tissue culture,and it shows the following conclusion:

1.stem with axillary bud with 75% alcohol disinfected 30s, washed four times with sterile distilled water, and then disinfected of 0.1% mercuric chloride 15min, washed five times with distilled water, the contamination rate can be less than 5%.

2.The best time chossing the explants of Carpinus betula is May.

3.low concentrations of IBA and lower concentrations of TDZ to promote the growth of axillary buds, higher concentrations of TDZ inhibited growth. High rooting percentages were obtained with 0.1mg·L^-1IBA 0.5 mg·L^-1TDZ. The highest percentages of rooting can be obtained with combination of 0.2mg·L^-1IBA 0.5 mg·L^-1 of NAA .

4.IBA is useful for the proliferation of Carpinus betulus. WPM 0.5mg/L 6-BA 0.5mg/L IBA is best for the proliferation of Carpinus betulus.

Keywords: Carpinus betulus; tissue culture; plant hormones; rooting

目 录

1前言 1

1.1植物组织培养概述 1

1.1.1植物组织培养的概念 1

1.1.2植物组织培养的理论基础 1

1.1.3植物组织培养技术的步骤 2

1.2植物组织培养概况 3

1.2.1植物组织培养的发展概况 3

1.2.2植物组织培养的应用领域 4

1.3木本植物的组织培养 6

1.3.1木本植物组织培养 6

1.3.2木本植物组织培养的影响因素 7

1.3.3木本植物组培技术的发展与现状 8

1.3.4木本植物组培技术的程序 9

1.4欧洲鹅耳枥研究进展 10

1.4.1欧洲鹅耳枥生物学特性及用途 10

1.4.2欧洲鹅耳枥繁殖研究进展 10

1.4.3欧洲鹅耳枥组织培养研究的意义 11

2材料与方法 11

2.1试验材料 11

2.2试验方法 12

2.2.1外植体处理 12

2.2.2不定芽的诱导与分化 13

2.2.3愈伤组织的诱导 14

2.2.4不定芽的增殖 14

2.2.5统计与分析 15

2.3试验准备 15

2.3.1主要试剂与仪器 15

2.3.2各种激素的配置方法 15

3结果与分析 16

3.1不定芽的诱导与分化 16

3.2不同外植体对愈伤诱导的影响 18

3.3激素对不定芽增殖的影响 19

4结论与讨论 20

4.1结论 20

4.2讨论 20

致谢 21

参考文献 22

1前言

1.1植物组织培养概述

从Habertandt第一次提出植物细胞全能性的概念, 到Steward 和Reinert 将胡萝卜髓细胞培养成完整植株证实了细胞的全能性以来, 组织培养得到了广泛研究和应用，目前通过组培技术获取植株的植物种类日益增多^{[1 ,3]}。至今能进行组织培养的植物已有上千种。运用组织培养方法可以在比较简单易观察的条件下研究细胞、组织或器官的繁殖、生长和分化，以及各种外界因素对它们的影响，从而为解决农业生产和药物生产中的某些问题开辟了广阔的前景。

1.1.1植物组织培养的概念

狭义概念是指对植物体组织或由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养直至生成完整植株。

广义概念是指无菌操作分离植物体一部分(即外植体)接种到培养基，在人工条件下培养直至生成完整植株。

1.1.2植物组织培养的理论基础

细胞全能性（totipotency）指在多细胞生物中的每个体细胞内的细胞核所具有个体发育的全部基因，只要条件许可，都可发育成完整的个体。其中在植物细胞体内，根据植物细胞表达全能性大小排列是：受精卵、生殖细胞、体细胞。全能性的物质基础是细胞内含有本物种全套遗传物质。一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会有一整套发育成一个完整植株的遗传基础，在适当的条件下可以通过分裂、分化再生成一个完整的植株，如图1所示。

图1 组织培养原理图

1.1.3植物组织培养技术的步骤

(1)外植体的选择